Duales Luziferase-Reporter-Assay-Kit DL101

Duales Luziferase-Reporter-Assay-Kit DL101

Das Dual Luciferase Reporter Assay Kit wird zum Nachweis der Genregulation verwendet, indem Zellen mit einem Reporterplasmid transfiziert werden und die Fluoreszenzintensität des Luciferin-Substrats gemessen wird, um das Niveau der Luciferase-Expression wiederzugeben. Um eine duale Luciferase-Reportergen-Detektion zu erreichen, wird Firefly-Luciferase mit Luciferin als Substrat und Renilla-Iuciferase mit Coelenterazin als Substrat detektiert, wobei die Aktivität der Firefly-Luciferase gehemmt wird. Mit dem Dual Luciferase Reporter Assay Kit kann die Expression von Luciferase, die durch Genelemente reguliert wird, sensitiv und effizient nachgewiesen werden. Normalerweise wird das transkriptionelle regulatorische Element stromaufwärts der Firefly-Luciferase oder die 3'-UTR-Regulationsregion stromabwärts der Firefly-Luciferase geklont. Die transfizierten Zellen werden durch einen entsprechenden Stimulator induziert und lysiert, um die Luziferaseaktivität zu bestimmen. Die stimulator-induzierende Wirkung der regulatorischen Elemente wird anhand der Luziferase-Aktivität bewertet. Renilla-Luciferase dient als interne Referenz für die Korrektur der Transfektionseffizienz, um Unterschiede in der Zellzahl und Transfektionseffizienz zwischen den Vertiefungen zu eliminieren. Glühwürmchen-Luciferase katalysiert die Emission von Luciferin bei 560 nm und Renilla-Luciferase katalysiert die Emission von Coelenterazin bei 465 nm.

Produktvorteile:

Das Fluoreszenzsignal ist stark; Breiter Erfassungsbereich; hohe Empfindlichkeit

Komponenten: DL101-01: 100 rxns (100 μl/rxn)

• 5 x Cell Lysis Buffer: 10 ml
• Reaction Buffer II (Luciferase): 10 ml
  
• Luciferase Substrate (Lyophilized): 1 vial
• Stop & Reaction Buffer: 10 ml
• Renilla Substrate: 200µl

Hinweis:

Lagerung bei -20°C für bis zu 12 Monate; das gelöste und aliquotierte Luziferase-Substrat kann bei -80°C für lange Zeit oder bei -20°C für eine kurzfristige Lagerung für nicht mehr als 1 Monat gelagert werden